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Esto apunta a una desregulación específica de la expresión de ACT en el caso de las heridas de difícil cicatrización de wundheilung bei diabetes typ 1 diabéticos y de humanos diabéticos, así como en las heridas arteriales de difícil cicatrización.

La sorprendente observación de que tanto la fuerza de la expresión como de la función, particularmente la actividad, de ACT en el caso de las heridas de difícil cicatrización de mamíferos diabéticos y de humanos diabéticos por un lado, y de las heridas arteriales de difícil cicatrización por el otro lado, no cambiaron o se redujeron fuertemente en relación con aquéllas en una piel intacta o en forma relativa a la cicatrización normal de las heridas, respectivamente, abrieron la posibilidad para un tratamiento de cicatrización de las heridas incrementando la cantidad y la función, particularmente la actividad de ACT en la herida.

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El término "variantes funcionales" como se lo usa aquí, se entiende que significa variantes de los polipéptidos que pueden usarse de acuerdo con la invención, cuyas variantes no poseen ninguna especificidad en la inhibición de la proteasa con relación a la catepsina G que se altera significativamente, comparada con aquella del polipéptido nativo de ACT. Se da preferencia particular a las supresiones que wundheilung bei diabetes typ 1 al péptido señal, o partes del mismo en los N-terminales del polipéptido.

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Otros ejemplos de polipéptidos que son codificados por diferentes alelos del gen, en individuos diferentes o en órganos diferentes, y que, cuando se los compara con el polipéptido nativo no exhiben ninguna especificidad del inhibidor de la proteasa que se altere significativamente cuando se los compara con aquélla del polipéptido nativo en un organismo.

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Dentro del significado de la presente invención, link heridas asociadas con la diabetes que cicatrizan difícilmente, deben entenderse como lesiones de la piel en mamíferos y humanos que sufren de diabetes.

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En heridas de cicatrización normal, se logra un equilibrio entre la actividad proteolítica y antiproteolítica para un amplio rango de inhibidores de proteasa. Se cree que esta deficiencia conduciría a un incompleto "escudo antiproteasa" con wundheilung bei diabetes typ 1 a aquellos inhibidores de proteasa.

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Estos resultados se confirman con otros estudios Nwomeh y colaboradores,J. Se ha sugerido, por lo tanto, incrementar el escudo antiproteasa, elevando o induciendo la expresión de los inhibidores de la proteasa que se redujeron o faltan, respectivamente, administrando inhibidores de proteasa exógenos.

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En años recientes, los factores de crecimiento han sido probados por su capacidad para mejorar la cicatrización de las heridas sin ser capaces, sin embargo, de mejorar la terapia convencional en una forma decisiva. Por lo tanto, el objeto de la presente invención era el de encontrar un nuevo compuesto activo que mejorara en forma crucial la cicatrización de las heridas arteriales wundheilung bei diabetes typ 1 difícil cicatrización y de aquellas asociadas con la diabetes de difícil cicatrización.

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En forma wundheilung bei diabetes typ 1, la presente invención muestra que la expresión de murina ACT en las heridas de ratones diabéticos resultó ser significativamente menor, en comparación con aquella de una piel intacta, mientras que un marcado incremento en la expresión de ACT, en comparación con la de una piel intacta, fue observado tanto en las heridas de los animales de control con cicatrización normal como en las heridas de cicatrización deficiente de animales mayores y en los animales tratados con dexametasona sufriendo de una deficiente cicatrización de las heridas.

Esto apunta a una desregulación específica de la expresión more info ACT en el caso de las heridas de difícil cicatrización de mamíferos diabéticos y de humanos wundheilung bei diabetes typ 1, así como en las heridas arteriales de difícil cicatrización.

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La sorprendente observación de que tanto la fuerza de la expresión como de la función, particularmente la actividad, de ACT en el caso de las heridas de difícil cicatrización de mamíferos diabéticos y de humanos diabéticos por un lado, y de las heridas arteriales de difícil wundheilung bei diabetes typ 1 por el otro lado, no cambiaron o se redujeron fuertemente en relación con aquéllas en una piel intacta o en forma relativa a la cicatrización normal de las heridas, respectivamente, abrieron la posibilidad para un tratamiento de cicatrización de las heridas incrementando la cantidad y la función, particularmente la actividad de ACT en la herida.

En el caso de las perturbaciones en la cicatrización de las see more vistas en las heridas de difícil cicatrización de animales mayores, y en los animales tratados con dexametasona que sufren de una cicatrización deficiente de las heridas, han sido considerados otros factores como los responsables de la difícil cicatrización de las heridas ya que, en estos casos, no hubo una regulación aberrante de la expresión y de la función de ACT, particularmente la actividad, en las heridas wundheilung bei diabetes typ 1 comparación con la piel intacta o la cicatrización normal de las heridas, respectivamente.

Los experimentos por ejemplo, Ejemplo 3 que se realizaron dentro del contexto de esta invención, demostraron la eficacia en el uso, de acuerdo con la invención, de los polipéptidos ACT para el tratamiento de las heridas de difícil cicatrización de wundheilung bei diabetes typ 1 mamíferos diabéticos.

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Fue posible lograr un mejoramiento pronunciado en la cicatrización de las heridas de las heridas de difícil cicatrización de animales diabéticos, incrementando el homólogo de murina ACT mACT en wundheilung bei diabetes typ 1 heridas de ratas diabéticas con deterioro arterial versus las heridas de cicatrización normal, puesto que la cicatrización de las heridas de las heridas de cicatrización normal no fueron afectadas por la administración del mACT.

La expresión disminuida de ACT esta casualmente involucrada en la deficiente cicatrización de las heridas, específicamente en las heridas asociadas con la deficiente cicatrización de la diabetes.

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En humanos, se conoce un gen para la ACT, con el polimorfismo como el descrito, particularmente en la secuencia del péptido señal Rubin,entrada a la base datos. Otros miembros de la familia de los inhibidores de la proteasa de la serina de roedor son, spi y spi3 en la rata, y un homólogo de spi wundheilung bei diabetes typ 1 Adodemus sylvaticus Inglis y colaboradores, ver arriba.

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Las siguientes observaciones proveen evidencia de que, mientras que la ACT ha sido descrita en contexto con enfermedades diferentes, nunca ha sido realizado un wundheilung bei diabetes typ 1 entre una disminución en la expresión de ACT y las heridas diabéticas de difícil cicatrización. La deficiencia heredada de ACT es pleyomórfica y es frecuentemente asociada con la hepatitis crónica con el volumen residual incrementado del pulmón Eriksson y colaboradores,Acta Med.

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Otolaryngol, La ACT también mostró que inhibe a las quimasas en mastositos, por cuya razón se ha descrito la ACT en contexto con las reacciones alérgicas Lindmark y Wallengren, Allergy, Sin embargo, los resultados señalan a la quimasa jugando solamente un papel subordinado en el patomecanismo de la soriasis Harvima y colaboradores,Acta.

De acuerdo con EP, la ACT podría usarse para el tratamiento de "inflamaciones de la piel", "quemaduras", y "condiciones dermatológicas". Sin embargo, EP no wundheilung bei diabetes typ 1 el significado de, "condición dermatológica".

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Tomadas en conjunto, aunque a esta enzima se la conoce desde hace mucho tiempo en biotecnología, y ha sido investigada extensivamente desde el punto de vista médico, no se ha descrito una wundheilung bei diabetes typ 1 entre la ACT y las heridas asociadas con la diabetes que cicatrizan difícilmente.

Por lo tanto, no existen investigaciones, por ejemplo, con relación a la expresión de ACT en las heridas, en particular las heridas asociadas con la diabetes que cicatrizan difícilmente.

Sin embargo, tales mutantes híbridos conllevan el peligro de efectos secundarios impredecibles y de interacciones, ya sea con anticuerpos que reconozcan a estas proteínas como extrañas o con otras proteasas no probadas. En contraste, el efecto sobre sólo una proteasa es comparativamente simple de seguir, y por lo tanto es posible lograr un efecto curativo específico article source pocos efectos secundarios.

El término "variantes funcionales" como se lo usa aquí, se entiende que significa variantes de los polipéptidos que pueden usarse de acuerdo con la invención, cuyas variantes wundheilung bei diabetes typ 1 poseen ninguna especificidad en la inhibición de la proteasa con relación a la catepsina G que se altera significativamente, comparada con aquella del polipéptido nativo de ACT.

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Se da preferencia particular a las supresiones que afectan al péptido señal, o partes del mismo en los N-terminales del polipéptido. Ejemplos de tales variantes, cuya especificidad del inhibidor de la proteasa no se altera significativamente en comparación con aquella del polipéptido nativo, son los polipéptidos que son homólogos con wundheilung bei diabetes typ 1 polipéptidos usados de acuerdo con la invención y que se derivan, en particular, de organismos diferentes a los de los humanos o los ratones, preferiblemente de los mamíferos no humanos tales como los monos, los cerdos y las ratas.

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Otros ejemplos de polipéptidos que son codificados por diferentes alelos del gen, en individuos diferentes o en órganos diferentes, y que, more info se los compara con el polipéptido nativo no exhiben ninguna especificidad del inhibidor de la proteasa que se altere significativamente cuando se los compara con aquélla del polipéptido nativo en un organismo. Ejemplos de variantes funcionales son los polipéptidos ACT en los cuales el péptido señal, o una parte del mismo, se suprime, por ejemplo un polipéptido de acuerdo a la SEQ.

Son posibles las variantes humanas variantes que tienen un rizo reactivo que wundheilung bei diabetes typ 1 conserve, en comparación con la SEQ.

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Otras variantes son los polipéptidos del inhibidor de la proteasa de serina, que como la SEQ. El polipéptido puede ser codificado por una secuencia de longitud completa o por cualquier parte de la secuencia que codifica mientras que el polipéptido sea una variante funcional.

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El término "variantes" como se lo usa aquí denota todas las secuencias wundheilung bei diabetes typ 1 ADN que son complementarias de una secuencia de ADN secuencia de referenciaque codifican los polipéptidos usados de acuerdo con a invención de las secuencias SEQ. Dentro del significado de la presente invención, las heridas asociadas con la diabetes que cicatrizan difícilmente, deben entenderse como lesiones de la piel en mamíferos y humanos que sufren de diabetes.

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Dentro del significado de la presente invención, actividad de ACT abarca preferiblemente el enlazamiento y la inhibición de la proteasa Catepsina G. Los ensayos adecuados para determinar la actividad de ACT son los ensayos inhibitorios de la proteasa tales como, por ejemplo, el Ejemplo 5 o Heidtmann y colaboradores,Clin.

Chem, Un "cambio significativo en la especificidad del inhibidor de la proteasa" con relación a la elastasa se entiende que es un cambio que consiste en un incremento en la actividad inhibidora de la elastasa por lo menos en un wundheilung bei diabetes typ 1 deen particular por lo menos un wundheilung bei diabetes typ 1 deespecialmente por lo menos un factor decomparado con la secuencia nativa de ACT, si tal actividad no es medible en la secuencia nativa, consiste en al menos 0, veces see more actividad inhibidora de la elastasa comparada con aquella del inhibidor de la alfa-1 proteasa inhibidor de la elastasa endógena.

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En general, se prefiere al ADN bicatenario para expresar al gen revelante, tanto para preparar un polipéptido que pueda wundheilung bei diabetes typ 1 usado de acuerdo con la invención y en asocio con un vector wundheilung bei diabetes typ 1 sea aplicable en terapia génica y que pueda ser usado de acuerdo con la invención, con una preferencia particular que se le da a la región ADN que codifica al polipéptido. En eucariotas, esta región comienza con el primer codón de inicio ATG que esta localizado en una secuencia Kozak Kozak,Nucleic.

La invención también comprende el uso de un vector que expresa see more proteína de utilizable de acuerdo con la invención.

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Los vectores de expresión que son usados para preparar un polipéptido que puede ser usado de acuerdo con la invención, pueden ser vectores de expresión procarióticos u eucarióticos. Ejemplos de vectores de expresión procarióticos son lo vectores pGEM o derivados de pUC, que son usados para expresión en E.

Resultados: Exactos: 2.

Acids Res. En general, los vectores de expresión también contienen promotores que son adecuados para la respectiva célula hospedera, tal como el promotor trp para la expresión en E. EP-B Los promotores que permiten en forma constitutiva y regulable wundheilung bei diabetes typ 1 expresión específica para tejido, específica para tipo celular, específica para ciclo celular, o específica para metabolismo en células eucariotas, son adecuados, por ejemplo, para la expresión en células de mamíferos.

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Ejemplos de wundheilung bei diabetes typ 1 regulables que permiten la expresión inducible en eucariotas son el operador de tetraciclina en combinación con un represor apropiado Gossen M. Rogers y colaboradores pgs. Otros ejemplos de elementos regulables que permiten la expresión específica para tejido en eucariotas son secuencias promotoras o activadoras de promotores o mejoradores de aquellos genes link codifican proteínas que se expresan solamente en tipos de células particulares.

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Ejemplos de elementos regulables que permiten la expresión específica para metabolismo en eucariotas, son los promotores que son regulados por hipoxia, por deficiencia de glucosa, por concentración de fosfato o por choque por calor.

Un wundheilung bei diabetes typ 1 de un elemento regulable que permite la expresión específica por queratinocito en la piel es el elemento FiRE Jaakkola y colaboradores,Gen.

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La expresión de esta proteína de fusión se controla por un promotor específico para tejido. Particularmente, los vectores virales apropiados en este contexto son: baculovirus, wundheilung bei diabetes typ 1 vaccinia, adenovirus, virus adeno-asociados y virus herpes. Los vectores no virales particularmente adecuados en este contexto son: liposomas, virosomas, lípidos catiónicos y ADN conjugado con polilisina.

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Ejemplos de vectores que son aplicables en terapia génica son los vectores virales, por ejemplo vectores adenovirales o vectores retrovirales Lindemann y colaboradores,Mol. En la lipofección, las pequeñas vesículas unilaminares, que consisten de lípidos catiónicos, se preparan sometiendo la suspensión de liposoma a ultrasonido. Y colaboradoresProc.

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USA 86, ; Felgner J. Acta click, Los lípidos catiónicos de la citofectina GS han probado ser muy adecuados para la transfección de queratinocitos in vitro e in vivo US 5.

USA, wundheilung bei diabetes typ 1 Los liposomas son portadores farmacéuticamente aceptables dentro del significado de la presente invención. El término "liposomas" abarca, por ejemplo, composiciones liposomales que se describen en US 5.

La sustancia terapéuticamente activa también pude conjugarse al liposoma o puede conjugarse a un polímero de hidrogel, en donde el polímero de hidrogel o un componente del polímero de hidrogel se conjuga al liposoma, o puede ser wundheilung bei diabetes typ 1 por un liposoma.

El término "liposomas" abarca, por ejemplo, las composiciones liposomales que se describen en US 5. La sustancia farmacéuticamente activa puede conjugarse al liposoma o puede conjugarse a un polímero de hidrogel, siendo posible para el polímero de hidrogel o un componente del polímero de hidrogel conjugarse a un liposoma o ser encerrado por un liposoma.

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Los dispositivos para realizar la inyección intradérmica usando presión han sido descritos, por ejemplo, en US 5. USA 88, Las células pueden ser bien sea procariotas o eucariotas. Ejemplos de células procariotas son E.

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Por lo tanto, las células e E. El uso de células de E.

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Ejemplos de células adecuadas son las cepas de E. Diabetes mihaela diaconu sanofi.

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